Giới hạn của định lượng. Về việc phê duyệt hướng dẫn xác nhận các phương pháp phân tích để kiểm tra các sản phẩm thuốc Công thức giới hạn xác định định lượng

Mỗi phương pháp thiết bị được đặc trưng bởi một mức độ ồn nhất định liên quan đến các chi tiết cụ thể của quá trình đo. Do đó, luôn có một giới hạn nồng độ dưới mức mà một chất không thể được phát hiện một cách đáng tin cậy.

Giới hạn phát hiệnС min, P - hàm lượng nhỏ nhất mà tại đó có thể phát hiện được sự có mặt của thành phần với mức tin cậy đã cho bằng phương pháp này.

Giới hạn phát hiện cũng có thể được đặt bằng tín hiệu phân tích nhỏ nhất y min, tín hiệu này có thể được phân biệt một cách tự tin với tín hiệu của thí nghiệm đối chứng - nền y.

Phương pháp thống kê sử dụng bất đẳng thức Chebyshev đã chứng minh rằng giới hạn phát hiện có thể được xác định một cách định lượng bằng cách sử dụng biểu thức

Trong đó nền s là độ lệch chuẩn của tín hiệu nền phân tích; S là hệ số độ nhạy (đôi khi được gọi đơn giản là "độ nhạy"), nó đặc trưng cho phản ứng của tín hiệu phân tích đối với hàm lượng của thành phần. Hệ số độ nhạy là giá trị của đạo hàm đầu tiên của hàm hiệu chuẩn đối với một phép xác định nồng độ nhất định. Đối với đường chuẩn đường thẳng, đây là tiếp tuyến của hệ số góc:

(Chú ý: đừng bối rối yếu tố nhạy cảmS với độ lệch chuẩnS!)

Có các phương pháp khác để tính toán giới hạn phát hiện, nhưng phương trình này được sử dụng phổ biến nhất.

Trong phân tích hóa học định lượng, một loạt các hàm lượng hoặc nồng độ xác định thường được đưa ra. Nó có nghĩa là phạm vi giá trị của các hàm lượng xác định (nồng độ) được cung cấp bởi phương pháp luận này và được giới hạn bởi giới hạn dưới và giới hạn trên của nồng độ xác định.

Các nhà phân tích thường quan tâm đến giới hạn dưới của nồng độ xác định. Với n hoặc nội dung m n thành phần được xác định bằng phương pháp này. Vượt quá giới hạn dưới của các nội dung đã xác định thường lấy lượng hoặc nồng độ tối thiểu có thể được xác định với độ lệch chuẩn tương đối

. .

Thí dụ

Nồng độ khối lượng của sắt trong dung dịch được xác định bằng phương pháp đo quang phổ bằng cách đo mật độ quang học của các dung dịch có màu do phản ứng tương tác của ion Fe 3+ với axit sulfosalicylic. Để xây dựng sự phụ thuộc của hiệu chuẩn, người ta đo mật độ quang học của các dung dịch có nồng độ sắt được xử lý bằng axit sulfosalicylic tăng dần (xác định).

Mật độ quang học của dung dịch đối chiếu (thí nghiệm đối chứng cho thuốc thử, tức là không bổ sung sắt, (nền) là 0,002; 0,000; 0,008; 0,006; 0,003.

Tính toán giới hạn phát hiện sắt.

Giải pháp

1) Kết quả của các phép tính theo phương pháp bình phương nhỏ nhất (xem ví dụ cho nhiệm vụ điều khiển số 5), các giá trị để xây dựng đồ thị hiệu chuẩn thu được.

Các giá trị được tính toán để xây dựng đồ thị hiệu chuẩn

2) Chúng tôi tính toán hệ số nhạy, tức là hệ số góc của sự phụ thuộc hiệu chuẩn (S) theo dữ liệu bảng.

3) Tính toán độ lệch chuẩn nền, là gì 0,0032 đơn vị của mật độ quang.

4) Giới hạn phát hiện sẽ là, mg / cm 3

Kiểm soát nhiệm vụ số 6

Xác định giới hạn phát hiện của sắt trong nước.

Dữ liệu ban đầu : các giá trị của mật độ quang của nền (dung dịch đối chiếu) khi xây dựng đường chuẩn để xác định sắt là 0,003; 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Các giá trị của mật độ quang tương ứng với nồng độ của sắt trong dung dịch được trình bày trong bảng của nhiệm vụ điều khiển số 5.

Tính giới hạn phát hiện của sắt theo đơn vị mg / cm 3 theo hệ số độ nhạy S, tính toán trên cơ sở số liệu thu được để xây dựng đường chuẩn theo phương pháp bình phương nhỏ nhất khi thực hiện nhiệm vụ điều khiển số 5;

Giới hạn định lượng

"... Giới hạn định lượng (LOQ) (trong phép xác định phân tích): Nồng độ thấp nhất của chất phân tích hoặc chất phân tích trong mẫu thử nghiệm có thể được định lượng với mức độ chính xác và độ tin cậy chấp nhận được, như được chứng minh bằng thử nghiệm cộng tác trong phòng thí nghiệm hoặc phương pháp thích hợp khác xác thực phương thức ... "

Một nguồn:

"CÁC SẢN PHẨM THỰC PHẨM. CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH ĐỂ PHÁT HIỆN CÁC TỔ CHỨC DI TRUYỀN ĐƯỢC SỬA ĐỔI VÀ CÁC SẢN PHẨM CÓ TỪ CHÚNG. YÊU CẦU VÀ ĐỊNH NGHĨA CHUNG. MỤC TIÊU R 53214-2008 (ISO 24276: 2006)"

(được phê duyệt bởi Lệnh của Rostekhregulirovanie từ ngày 25.12.2008 N 708-st)

Thuật ngữ chính thức... Học thuật.ru. 2012.

Xem "Giới hạn định lượng" là gì trong các từ điển khác:

giới hạn định lượng- 3.7 giới hạn định lượng [LOQ]: tăng gấp 10 lần ước tính độ lệch chuẩn của khối lượng mẫu. Lưu ý Giá trị LOQ được sử dụng làm ngưỡng trên đó khối lượng ... ...

giới hạn lặp lại- 3.7 Giới hạn độ lặp lại: Chênh lệch tuyệt đối giữa kết quả của giá trị lớn nhất và nhỏ nhất từ ​​số phép đo được chỉ định được thực hiện trong các điều kiện lặp lại phù hợp với GOST R ISO 5725 1. Nguồn ... Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

giới hạn tái tạo- Giới hạn tái lập 2,9: Giá trị dưới đây, với xác suất 95%, là giá trị tuyệt đối của hiệu số giữa hai kết quả thử nghiệm thu được trong các điều kiện tái lập. Một nguồn… Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

giới hạn lặp lại (hội tụ)- Giá trị giới hạn độ lặp lại 3.11, với độ tin cậy 95%, không được vượt quá giá trị tuyệt đối của hiệu số giữa hai phép đo (hoặc phép thử) thu được trong điều kiện lặp lại ... Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

Giới hạn chính xác nội khoa- 3.11 Giới hạn độ chụm nội phòng thí nghiệm: Chênh lệch tuyệt đối cho phép đối với xác suất giả định P giữa hai kết quả phân tích thu được trong điều kiện độ chụm nội phòng thí nghiệm. Một nguồn… Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

giới hạn tái tạo R- Giới hạn tái lập 2.19.2 R: Giá trị tuyệt đối của hiệu số giữa hai kết quả thử nghiệm trong các điều kiện tái lập (xem 2.19.1) với độ tin cậy 95%. 2.19.1, 2.19.2 (Phiên bản đã thay đổi, tiêu đề = Thay đổi số 1, IUS 12 2002). ... ... Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

MI 2881-2004: Khuyến nghị. GSE. Kỹ thuật phân tích hóa học định lượng. Thủ tục xác minh việc chấp nhận kết quả phân tích- Thuật ngữ MI 2881 2004: Khuyến nghị. GSE. Kỹ thuật phân tích hóa học định lượng. Các thủ tục để xác minh khả năng chấp nhận của các kết quả phân tích: 3.17 Chênh lệch trọng yếu: Chênh lệch tuyệt đối cho phép đối với xác suất giả định là 95% giữa ... ... Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

GOST R 50779.11-2000: Phương pháp thống kê. Quản lý chất lượng thống kê. Điều khoản và Định nghĩa- Thuật ngữ GOST R 50779.11 2000: Phương pháp thống kê. Quản lý chất lượng thống kê. Thuật ngữ và định nghĩa Tài liệu gốc: 3.4.3 (trên và dưới) giới hạn quy định Đường biên giới trên bản đồ kiểm soát, trên đó giới hạn trên, ... ... Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

GOST R 50779.10-2000: Phương pháp thống kê. Xác suất và thống kê cơ bản. Điều khoản và Định nghĩa- Thuật ngữ GOST R 50779.10 2000: Phương pháp thống kê. Xác suất và thống kê cơ bản. Các thuật ngữ và định nghĩa trong tài liệu gốc: 2.3. (chung) dân số Tập hợp tất cả các đơn vị đang được xem xét. Lưu ý Đối với một biến ngẫu nhiên ... ... Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

RMG 61-2003: Hệ thống trạng thái để đảm bảo tính đồng nhất của các phép đo. Các chỉ tiêu về độ chính xác, độ đúng, độ chụm của các phương pháp phân tích hóa học định lượng. Phương pháp đánh giá- Thuật ngữ RMG 61 2003: Hệ thống trạng thái để đảm bảo tính đồng nhất của các phép đo. Các chỉ tiêu về độ chính xác, độ đúng, độ chụm của các phương pháp phân tích hóa học định lượng. Phương pháp đánh giá: 3.12 Độ chính xác trong phòng thí nghiệm: Độ chính xác ... Sách tham khảo từ điển về thuật ngữ của tài liệu quy chuẩn và kỹ thuật

BỘ Y TẾ LIÊN BANG NGA

BÀI VIẾT CHUNG VỀ DƯỢC LIỆU

Thẩm định các phương pháp phân tích OFS.1.1.0012.15

Được giới thiệu lần đầu tiên

Xác nhận phương pháp phân tích là bằng chứng thực nghiệm rằng một phương pháp phù hợp với mục đích đã định của nó.

Chuyên khảo về Dược điển này quy định các đặc điểm của các phương pháp phân tích được xác định nhằm mục đích xác nhận giá trị sử dụng và các tiêu chí tương ứng về tính phù hợp của các phương pháp đã được xác nhận nhằm kiểm tra chất lượng sản phẩm thuốc: dược chất và sản phẩm thuốc.

Các phương pháp xác định định lượng, bao gồm cả phương pháp xác định tạp chất và phương pháp xác định giới hạn hàm lượng đều phải được thẩm định. Các kỹ thuật xác thực được xác thực nếu cần thiết để xác nhận tính cụ thể của chúng.

Trong quá trình xác nhận, phương pháp phân tích được đánh giá theo các đặc điểm được liệt kê dưới đây, được lựa chọn có tính đến các khuyến nghị điển hình được đưa ra trong bảng:

• tính cụ thể;
• giới hạn phát hiện;
• giới hạn định lượng;
• khu vực phân tích (phạm vi);
• tuyến tính;
• tính đúng đắn (trueness);
• độ chính xác;
• sự mạnh mẽ.

Bảng 1 - Đặc điểm của các phương pháp được xác định trong quá trình xác nhận

*) có thể được xác định nếu cần thiết;

**) sự thiếu cụ thể của một phương pháp phân tích có thể được bù đắp bằng cách sử dụng một phương pháp phân tích khác.

Việc xác nhận lại (xác nhận lại) các phương pháp được thực hiện khi thay đổi:

• công nghệ thu nhận đối tượng phân tích;
• thành phần của sản phẩm thuốc (đối tượng phân tích);
• phương pháp phân tích đã được phê duyệt trước đó.

1. Tính đặc hiệu

Tính đặc hiệu là khả năng của kỹ thuật phân tích để đánh giá duy nhất một chất phân tích với sự có mặt của các thành phần liên quan.

Bằng chứng về tính cụ thể của phương pháp đã được xác nhận thường dựa trên việc phân tích dữ liệu thu được khi sử dụng nó để phân tích các hỗn hợp mô hình có thành phần đã biết.

Tính cụ thể của phương pháp đang được xác nhận cũng có thể được chứng minh bằng cách xử lý thống kê thích hợp các kết quả phân tích các đối tượng thực được thực hiện bằng cách sử dụng nó và song song, sử dụng một phương pháp khác, rõ ràng là cụ thể (một phương pháp mà tính cụ thể đã được chứng minh).

1.1 Đối với các thủ tục kiểm tra tính xác thực

Một phương pháp đã được xác nhận (hoặc một tập hợp các phương pháp) phải cung cấp thông tin đáng tin cậy về sự hiện diện của một chất hoạt tính nhất định trong một chất hoặc dạng bào chế nếu nó chứa các thành phần được cung cấp bởi công thức, được xác nhận bằng thực nghiệm.

Tính xác thực của hoạt chất trong dược chất hoặc sản phẩm thuốc được thiết lập so với mẫu chuẩn hoặc bằng các đặc tính hóa lý hoặc hóa học không phải là đặc trưng của các thành phần khác.

1.2 Đối với quy trình thử nghiệm và kiểm tra tạp chất

Các phương pháp tiếp cận tương tự được sử dụng cho phương pháp định lượng đã được xác nhận và để kiểm tra tạp chất - tính đặc hiệu của nó đối với chất phân tích phải được đánh giá, nghĩa là phải được thực nghiệm xác nhận rằng sự có mặt của các thành phần đi kèm không vô tình ảnh hưởng đến kết quả phân tích.

Cho phép đánh giá tính cụ thể của phương pháp đang được xác nhận bằng cách phân tích hỗn hợp mô hình của chế phẩm đã biết có chứa chất phân tích và bằng cách so sánh kết quả phân tích các đối tượng thực thu được đồng thời với việc sử dụng phương pháp đã được xác nhận và rõ ràng là cụ thể khác. Kết quả của các thí nghiệm tương ứng nên được xử lý thống kê.

Việc thiếu tính đặc hiệu của thử nghiệm có thể được bù đắp bằng (các) thử nghiệm bổ sung khác.

Khi thích hợp các phương pháp xác nhận, có thể sử dụng các mẫu sản phẩm thuốc đã được tiếp xúc với các điều kiện khắc nghiệt (ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm) hoặc đã được biến đổi về mặt hóa học theo bất kỳ cách nào phù hợp với mục đích tích tụ tạp chất trong đó.

Đối với kỹ thuật sắc ký, chỉ ra độ phân giải giữa hai chất rửa giải gần nhau nhất ở nồng độ thích hợp.

1. GIỚI HẠN PHÁT HIỆN

Giới hạn phát hiện là lượng (nồng độ) nhỏ nhất của chất phân tích trong mẫu có thể được phát hiện (hoặc ước tính) bằng cách sử dụng quy trình đã được xác nhận.

Giới hạn phát hiện trong các trường hợp chỉ ra trong bảng thường được biểu thị bằng nồng độ của chất phân tích (tính bằng% tương đối hoặc phần triệu - ppm).

Tùy thuộc vào loại kỹ thuật (trực quan hoặc công cụ), các phương pháp khác nhau được sử dụng để xác định giới hạn phát hiện.

2.1 Đối với các phương pháp đánh giá trực quan kết quả phân tích

Các mẫu với các lượng (nồng độ) chất phân tích đã biết khác nhau được thử nghiệm và giá trị nhỏ nhất được thiết lập để đánh giá kết quả phân tích bằng mắt thường. Giá trị này là ước tính của giới hạn phát hiện.

2.2 Đối với các phương pháp có công cụ đánh giá kết quả phân tích

2.2.1 Tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu

Cách tiếp cận này có thể áp dụng cho các phương pháp quan sát tiếng ồn đường cơ sở. So sánh các giá trị tín hiệu thu được đối với thí nghiệm đối chứng và đối với các mẫu có nồng độ chất phân tích thấp. Đặt lượng (nồng độ) nhỏ nhất của chất phân tích trong mẫu, tại đó tỷ lệ của tín hiệu phân tích với mức nhiễu bằng 3.

Giá trị được tìm thấy là ước tính của giới hạn phát hiện.

2.2.2 Bằng giá trị độ lệch chuẩn của tín hiệu và độ dốc của đồ thị hiệu chuẩn

Giới hạn phát hiện (LO) được tìm thấy bằng phương trình:

PO = 3,3 S/b,

ở đâu S

b- hệ số độ nhạy, là tỷ số của tín hiệu phân tích với giá trị xác định (tiếp tuyến của độ dốc của đường chuẩn).

S và b

S S a số hạng tự do của phương trình của đồ thị này. Giá trị thu được của giới hạn phát hiện, nếu cần, có thể được xác nhận bằng thực nghiệm trực tiếp ở lượng (nồng độ) của chất phân tích gần với giá trị của giới hạn phát hiện.

Theo quy định, nếu có dữ liệu về tính phù hợp của một phương pháp để xác định một cách đáng tin cậy một chất ở các nồng độ cả trên và dưới tiêu chuẩn đối với hàm lượng của nó được thiết lập theo tiêu chuẩn kỹ thuật, thì không cần phải xác định giới hạn phát hiện thực tế đối với một chất như vậy. phương pháp.

1. SỐ LƯỢNG GIỚI HẠN

Giới hạn định lượng là lượng (nồng độ) nhỏ nhất của một chất trong mẫu có thể được định lượng bằng quy trình đã được xác nhận với độ chính xác yêu cầu và độ chính xác nội phòng thí nghiệm (trung gian).

Giới hạn định lượng là một đặc tính xác nhận cần thiết của các phương pháp được sử dụng để đánh giá lượng nhỏ (nồng độ) của các chất trong mẫu và đặc biệt, để đánh giá hàm lượng tạp chất.

Tùy thuộc vào loại kỹ thuật, các phương pháp sau được sử dụng để tìm giới hạn định lượng.

3.1 Đối với các phương pháp đánh giá trực quan kết quả phân tích

Các mẫu với các lượng (nồng độ) chất phân tích đã biết khác nhau được thử nghiệm và giá trị nhỏ nhất được thiết lập mà tại đó kết quả phân tích có thể thu được bằng mắt thường với độ chính xác yêu cầu và độ chính xác trong phòng thí nghiệm (trung gian).

3.2 Đối với các phương pháp có công cụ đánh giá kết quả phân tích

3.2.1 Tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu

Nồng độ tối thiểu của chất phân tích trong mẫu được thiết lập, tại đó tỷ lệ của tín hiệu phân tích với mức nhiễu là khoảng 10: 1.

3.2.2 Bằng giá trị độ lệch chuẩn của tín hiệu và độ dốc của đồ thị hiệu chuẩn

Giới hạn định lượng (LQR) được tính theo phương trình:

PKO = 10 S/b,

ở đâu S Là độ lệch chuẩn của tín hiệu phân tích;

b- hệ số độ nhạy, là tỷ số của tín hiệu phân tích với giá trị xác định.

Với sự hiện diện của dữ liệu thử nghiệm trong một phạm vi rộng của giá trị đo được S và b có thể được ước lượng bằng phương pháp bình phương nhỏ nhất.

Đối với biểu đồ hiệu chuẩn tuyến tính, giá trị Sđược lấy bằng độ lệch chuẩn S a số hạng tự do của phương trình của đồ thị này. Giá trị thu được của giới hạn xác định định lượng, nếu cần, có thể được xác nhận bằng thực nghiệm trực tiếp ở lượng (nồng độ) chất phân tích gần với giá trị của giới hạn xác định định lượng.

Khi có bằng chứng về khả năng phát hiện chất phân tích một cách đáng tin cậy của phương pháp ở các nồng độ trên và dưới tỷ lệ quy định, thì thông thường không cần xác định giới hạn định lượng thực sự cho phép thử.

1. VÙNG PHÂN TÍCH CỦA QUY TRÌNH

Vùng phân tích của kỹ thuật là khoảng giữa các giá trị trên và dưới của các đặc trưng phân tích của thành phần xác định trong đối tượng phân tích (lượng, nồng độ, hoạt độ của nó, v.v.). Trong phạm vi này, các kết quả thu được bằng cách sử dụng phương pháp đang được xác nhận phải có mức độ đúng và độ chính xác trong phòng thí nghiệm (trung gian) có thể chấp nhận được.

Các yêu cầu sau đây được đặt ra đối với kích thước của khu vực phân tích của các phương pháp:

- các quy trình xác định định lượng phải được áp dụng trong phạm vi từ 80 đến 120% giá trị danh nghĩa của đặc tính phân tích được xác định;

- các kỹ thuật đánh giá độ đồng đều về liều lượng nên được áp dụng trong phạm vi từ 70 đến 130% của liều danh nghĩa;

- các kỹ thuật xét nghiệm được sử dụng trong phép thử Độ hòa tan thường phải được áp dụng trong phạm vi từ 50 đến 120% nồng độ dự kiến ​​của thành phần hoạt tính trong môi trường hòa tan;

- các phương pháp thử độ tinh khiết phải được áp dụng trong phạm vi từ "Giới hạn xác định định lượng" hoặc "Giới hạn phát hiện" đến 120% hàm lượng cho phép của tạp chất đã xác định.

Khu vực phân tích của kỹ thuật có thể được thiết lập từ phạm vi dữ liệu thực nghiệm thỏa mãn mô hình tuyến tính.

1. TUYẾN TÍNH

Tính tuyến tính của phương pháp là sự hiện diện của sự phụ thuộc tuyến tính của tín hiệu phân tích vào nồng độ hoặc lượng chất phân tích trong mẫu phân tích trong vùng phân tích của phương pháp.

Khi xác nhận một phương pháp, độ tuyến tính của nó trong khu vực phân tích được xác minh bằng thực nghiệm bằng cách đo các tín hiệu phân tích cho ít nhất 5 mẫu với các lượng hoặc nồng độ khác nhau của chất phân tích. Dữ liệu thử nghiệm được xử lý bằng phương pháp bình phương nhỏ nhất sử dụng mô hình tuyến tính:

y = b · x + Một,

X- lượng hoặc nồng độ của chất phân tích;

y- độ lớn của phản ứng;

b Là độ dốc;

Một- thành viên miễn phí (OFS "Xử lý thống kê kết quả của một thí nghiệm hóa học").

Các đại lượng được tính toán và báo cáo b, Một và hệ số tương quan r... Trong hầu hết các trường hợp, các mối quan hệ tuyến tính được sử dụng đáp ứng điều kiện 0,99 và chỉ khi phân tích lượng vết, các mối quan hệ tuyến tính mới được xem xét, với 0,9.

Trong một số trường hợp, khả năng xấp xỉ tuyến tính của dữ liệu thực nghiệm chỉ được cung cấp sau khi biến đổi toán học của chúng (ví dụ, logarit).

Đối với một số phương pháp phân tích, về nguyên tắc, không thể dựa trên mối quan hệ tuyến tính giữa các dữ liệu thực nghiệm, nồng độ hoặc lượng của một chất được xác định bằng cách sử dụng các đường chuẩn phi tuyến tính. Trong trường hợp này, đồ thị sự phụ thuộc của tín hiệu phân tích vào lượng hoặc nồng độ của chất phân tích có thể được tính gần đúng bằng một hàm phi tuyến thích hợp sử dụng phương pháp bình phương nhỏ nhất, điều này khả thi với sự có mặt của phần mềm đã được xác nhận tương ứng.

1. BÊN PHẢI

Tính đúng đắn của kỹ thuật được đặc trưng bởi độ lệch của kết quả trung bình của các phép xác định được thực hiện với việc sử dụng nó so với giá trị được coi là đúng.

Một kỹ thuật đã được xác thực được công nhận là đúng nếu các giá trị giả định là đúng nằm trong khoảng tin cậy của các kết quả phân tích trung bình tương ứng thu được bằng thực nghiệm bằng kỹ thuật này.

Các cách tiếp cận sau có thể áp dụng để đánh giá độ chính xác của các kỹ thuật định lượng:

a) phân tích sử dụng phương pháp đã được kiểm chứng của vật liệu chuẩn hoặc hỗn hợp mô hình với hàm lượng (nồng độ) của chất phân tích đã biết trước;

b) so sánh các kết quả thu được bằng cách sử dụng phương pháp luận đã được xác thực và phương pháp luận mẫu mực, tính đúng đắn của phương pháp luận đã được thiết lập trước đó;

c) xem xét các kết quả nghiên cứu độ tuyến tính của phương pháp đang được xác nhận: nếu số hạng tự do trong phương trình nêu trong Phần 5 không khác 0 có ý nghĩa thống kê, thì việc sử dụng phương pháp đó cho kết quả không có sai số hệ thống.

Đối với các phương pháp tiếp cận "a" và "b", có thể trình bày dữ liệu thu được dưới dạng phương trình phụ thuộc tuyến tính (hồi quy) giữa giá trị thực và giá trị thực tìm được bằng thực nghiệm. Đối với phương trình này, các giả thuyết về đẳng thức của hệ số góc đối với đơn vị của tiếp tuyến được kiểm tra b và sự biến mất của thời hạn miễn phí Một... Theo quy định, nếu các giả thuyết này được công nhận là đúng ở mức độ tin cậy 0,05, thì việc sử dụng phương pháp đang được xác nhận sẽ cho kết quả chính xác, tức là không có sai lệch.

1. ĐỘ CHÍNH XÁC

Độ chụm của một kỹ thuật được đặc trưng bởi sự phân tán của các kết quả thu được khi sử dụng nó so với giá trị của kết quả trung bình. Phép đo độ phân tán này là độ lệch chuẩn của kết quả của một phép xác định duy nhất, thu được đối với mẫu có kích thước đủ lớn.

Độ chụm được đánh giá đối với bất kỳ phương pháp định lượng nào dựa trên kết quả của ít nhất ba phép xác định cho mỗi mức trong số ba mức chất phân tích (thấp, trung bình và cao) nằm trong miền phân tích của phương pháp. Độ lặp lại cũng có thể được đánh giá đối với bất kỳ phương pháp xét nghiệm nào dựa trên tối thiểu sáu phép xác định đối với các mẫu có hàm lượng chất phân tích gần như danh định. Trong nhiều trường hợp, việc đánh giá độ chụm có thể được thực hiện theo kết quả xử lý số liệu thí nghiệm theo phương pháp bình phương nhỏ nhất, như đã nêu trong Chuyên khảo Dược điển “Xử lý thống kê kết quả thí nghiệm hóa học”.

Độ chính xác phải được thử nghiệm trên các mẫu đồng nhất và có thể được đánh giá theo ba cách:

- như độ lặp lại (hội tụ);

- như độ chụm trong phòng thí nghiệm (trung gian);

- như độ chụm liên phòng thử nghiệm (độ tái lập).

Kết quả đánh giá phương pháp phân tích đối với từng phương án độ chụm thường được đặc trưng bởi giá trị tương ứng của độ lệch chuẩn của kết quả của một phép xác định riêng biệt.

Thông thường, khi phát triển một kỹ thuật ban đầu, độ lặp lại (độ lặp lại) của các kết quả thu được khi sử dụng nó được xác định. Nếu cần thiết phải đưa kỹ thuật đã phát triển vào tài liệu quy định, thì độ chính xác trong phòng thí nghiệm (trung gian) của nó cũng được xác định thêm. Độ chụm liên phòng thí nghiệm (độ tái lập) của phương pháp được đánh giá khi nó được đưa vào dự thảo của tài liệu chuyên khảo, chuyên khảo hoặc tài liệu quy định chung cho các mẫu chuẩn dược điển.

7.1 Độ lặp lại (hội tụ)

Độ lặp lại của quy trình phân tích được đánh giá bằng các kết quả độc lập thu được trong cùng điều kiện quy định trong cùng một phòng thí nghiệm (cùng một người thực hiện, cùng một thiết bị, cùng một bộ thuốc thử) trong một khoảng thời gian ngắn.

7.2 Độ chính xác trong phòng thí nghiệm (trung gian)

Độ chính xác trong phòng thí nghiệm (trung gian) của phương pháp đang được xác nhận được đánh giá trong các điều kiện hoạt động của một phòng thí nghiệm (ngày khác nhau, người thực hiện khác nhau, thiết bị khác nhau, v.v.).

7.3 Độ chụm liên phòng thử nghiệm (độ tái lập)

Độ chụm liên phòng thử nghiệm (độ tái lập) của phương pháp đang được xác nhận được đánh giá bằng cách thử nghiệm trong các phòng thí nghiệm khác nhau.

1. SỰ BỀN VỮNG

Tính ổn định của một phương pháp đã được xác nhận là khả năng duy trì các đặc tính của nó trong các điều kiện tối ưu (danh nghĩa), như đã cho trong bảng, với độ lệch nhỏ có thể xảy ra so với các điều kiện phân tích này.

Độ mạnh của quy trình không nên được xác định liên quan đến các điều kiện thử nghiệm dễ dàng kiểm soát. Điều này làm giảm đáng kể nhu cầu về các nghiên cứu chuyên dụng về tính bền vững.

Chỉ nên nghiên cứu độ ổn định trong trường hợp phương pháp được xác nhận dựa trên việc sử dụng các phương pháp phân tích đặc biệt nhạy cảm với các điều kiện bên ngoài, chẳng hạn như các loại sắc ký và phân tích chức năng khác nhau. Nếu cần, việc đánh giá tính ổn định của phương pháp luận được thực hiện ở giai đoạn phát triển của nó. Nếu một kỹ thuật có độ ổn định thấp, thì việc xác minh tính phù hợp của kỹ thuật được thực hiện ngay trong quá trình sử dụng thực tế.

Kiểm tra tính phù hợp của hệ thống phân tích

Kiểm tra tính phù hợp của hệ thống phân tích là kiểm tra việc đáp ứng các yêu cầu cơ bản đối với hệ thống phân tích. Hệ thống đang được kiểm tra tính phù hợp là tập hợp các dụng cụ, thuốc thử, chất chuẩn và mẫu cụ thể được phân tích. Các yêu cầu đối với một hệ thống như vậy thường được quy định trong chuyên khảo chung về phương pháp phân tích tương ứng. Do đó, việc xác nhận tính phù hợp của hệ thống phân tích trở thành một thủ tục bao gồm trong phương pháp được xác nhận.

Trình bày kết quả xác nhận

Giao thức xác nhận phương pháp phân tích phải bao gồm:

- mô tả đầy đủ của nó, đủ để tái tạo và phản ánh tất cả các điều kiện cần thiết cho việc phân tích;

- các đặc điểm được đánh giá;

- tất cả các kết quả chính được đưa vào quá trình xử lý thống kê dữ liệu;

- kết quả của việc xử lý thống kê dữ liệu thu được bằng thực nghiệm trong quá trình phát triển hoặc xác minh một phương pháp đã được xác nhận;

- các tài liệu minh họa như bản sao của sắc ký đồ thu được bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao hoặc sắc ký khí; điện đồ, quang phổ điện tử và hồng ngoại; ảnh chụp hoặc bản vẽ sắc ký đồ thu được bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng hoặc giấy; các số liệu về đường chuẩn độ, đường chuẩn;

- kết luận về tính phù hợp của phương pháp được xác nhận để đưa vào văn bản quy định.

Tài liệu xác thực cho các phương pháp phân tích riêng lẻ nên được chuẩn bị dưới dạng báo cáo xác nhận hợp nhất.

TRƯỜNG CAO ĐNG

GIẢI PHÁP

Theo quy định tại Điều 30 của Hiệp ước về Liên minh Kinh tế Á-Âu ngày 29 tháng 5 năm 2014 và khoản 2 của Điều 3 của Hiệp định về các Nguyên tắc và Quy tắc thống nhất về lưu thông thuốc trong Liên minh Kinh tế Á-Âu ngày 23 tháng 12 năm 2014, Ban của Ủy ban Kinh tế Á-Âu

quyết định:

1. Phê duyệt Hướng dẫn thẩm định quy trình phân tích kiểm nghiệm thuốc kèm theo.

2. Quyết định này có hiệu lực sau 6 tháng kể từ ngày công bố chính thức.

chủ tịch Hội đồng quản trị
Ủy ban kinh tế Á-Âu
T. Sargsyan

Hướng dẫn xác nhận các quy trình phân tích để kiểm nghiệm thuốc

ĐƯỢC THÔNG QUA BỞI
Theo quyết định của Hội đồng quản trị
Ủy ban kinh tế Á-Âu
ngày 17/07/2018 N 113

I. Các quy định chung

1. Hướng dẫn này xác định các quy tắc xác thực các phương pháp phân tích để kiểm tra các sản phẩm thuốc, cũng như danh sách các đặc điểm cần đánh giá khi xác nhận các phương pháp này và được đưa vào hồ sơ đăng ký nộp cho các cơ quan có thẩm quyền của các Quốc gia thành viên của Liên minh Kinh tế Á-Âu ( sau đây, tương ứng là các Quốc gia Thành viên, Liên minh).

2. Mục đích của việc xác nhận quy trình phân tích để kiểm tra các sản phẩm thuốc là để chứng minh sự phù hợp của quy trình đó đối với mục đích đã định.

II. Các định nghĩa

3. Đối với mục đích của Hướng dẫn này, các khái niệm được sử dụng có nghĩa như sau:

"quy trình phân tích" - một kỹ thuật để kiểm tra các sản phẩm thuốc, bao gồm mô tả chi tiết về trình tự các hành động cần thiết để thực hiện một phép thử phân tích (bao gồm mô tả về việc chuẩn bị mẫu thử, mẫu chuẩn, thuốc thử, sử dụng thiết bị, kết cấu của đường chuẩn, các công thức tính toán đã sử dụng, v.v.);

"độ tái lập" là đặc tính của độ chụm trong phép thử liên phòng thử nghiệm;

"phạm vi ứng dụng (khu vực phân tích)" (phạm vi) - khoảng giữa nồng độ (lượng) cao nhất và thấp nhất của chất phân tích trong mẫu (bao gồm các nồng độ này), mà quy trình phân tích đã được chứng minh là có mức độ chấp nhận được là độ chính xác, độ chính xác và độ tuyến tính;

"độ tuyến tính" là sự phụ thuộc tỷ lệ thuận của tín hiệu phân tích vào nồng độ (lượng) chất phân tích trong mẫu trong phạm vi áp dụng (khu vực phân tích) của kỹ thuật;

"recovery (lấy lại)" (recovery) - tỷ số giữa giá trị trung bình thu được và giá trị true (tham chiếu), có tính đến các khoảng tin cậy tương ứng;

"độ lặp lại (độ chính xác trong xét nghiệm)" là độ chụm của quy trình khi các phép thử lặp lại được thực hiện trong cùng điều kiện vận hành (ví dụ: bởi cùng một nhà phân tích hoặc một nhóm nhà phân tích, trên cùng một thiết bị, với cùng một loại thuốc thử, vv) trong một khoảng thời gian ngắn;

"độ đúng" (độ chính xác, độ đúng) - độ gần giữa giá trị đúng (tham chiếu) được chấp nhận và giá trị nhận được, được thể hiện bằng giá trị của độ mở;

"giới hạn định lượng" - lượng nhỏ nhất của một chất trong mẫu có thể được định lượng với độ chính xác và độ chính xác thích hợp;

"giới hạn phát hiện" —lượng nhỏ nhất của chất phân tích trong mẫu có thể được phát hiện, nhưng không nhất thiết phải định lượng chính xác;

"độ chụm" là biểu thức của mức độ gần gũi (mức độ phân tán) của các kết quả (giá trị) giữa các loạt phép đo được thực hiện trên nhiều mẫu được lấy từ cùng một mẫu đồng nhất trong các điều kiện quy định;

"độ chính xác trung bình" - ảnh hưởng của các thay đổi trong phòng thí nghiệm (các ngày khác nhau, các nhà phân tích khác nhau, thiết bị khác nhau, các lô (nhiều) thuốc thử khác nhau, v.v.) đến kết quả của các phép thử của các mẫu giống hệt nhau được lấy từ cùng một loạt;

"tính đặc hiệu" - khả năng của kỹ thuật phân tích đánh giá rõ ràng chất cần xác định một cách độc lập với các chất khác (tạp chất, sản phẩm phân huỷ, tá dược, chất nền (môi trường, v.v.) có trong mẫu thử;

tính mạnh mẽ - Khả năng mạnh mẽ của quy trình phân tích trước các tác động của những thay đổi nhỏ quy định trong các điều kiện thử nghiệm, điều này cho thấy tính mạnh mẽ của quy trình này trong việc sử dụng thông thường (tiêu chuẩn).

III. Các loại thủ tục phân tích cần được xác nhận

4. Hướng dẫn này thảo luận về các cách tiếp cận xác nhận đối với 4 loại thủ tục phân tích phổ biến nhất:

a) các thử nghiệm để xác định (tính xác thực);

b) phép thử xác định hàm lượng tạp chất định lượng (phép thử định lượng hàm lượng tạp chất);

c) các phép thử để xác định hàm lượng giới hạn của tạp chất trong mẫu (phép thử giới hạn đối với các tạp chất đối chứng);

d) phép thử định lượng gốc hoạt động để xác định phần hoạt động của phân tử chất hoạt động trong mẫu thử.

5. Tất cả các phương pháp phân tích được sử dụng để kiểm tra chất lượng sản phẩm thuốc phải được xác nhận. Hướng dẫn này không đề cập đến việc xác nhận các phương pháp phân tích đối với các loại phép thử không có trong đoạn 4 của Hướng dẫn này (ví dụ, phép thử độ hòa tan hoặc xác định cỡ hạt (độ phân tán) của dược chất, v.v.).

6. Các phép thử để nhận biết (tính xác thực) bao gồm, theo quy tắc, so sánh các đặc tính (ví dụ: đặc điểm quang phổ, đặc tính sắc ký, khả năng phản ứng, v.v.) của phép thử và vật liệu chuẩn.

7. Phép thử xác định hàm lượng định lượng của tạp chất và phép thử xác định hàm lượng giới hạn của tạp chất trong mẫu nhằm mô tả đúng các đặc điểm về độ tinh khiết của mẫu. Các yêu cầu đối với việc xác nhận của các phương pháp xác định định lượng tạp chất khác với các yêu cầu đối với việc xác nhận của các phương pháp xác định hàm lượng giới hạn của các tạp chất trong mẫu.

8. Quy trình thử nghiệm định lượng nhằm mục đích đo hàm lượng của chất phân tích trong mẫu thử nghiệm. Trong Hướng dẫn này, định lượng đề cập đến phép đo định lượng các thành phần chính của dược chất. Các thông số xác nhận tương tự áp dụng cho việc định lượng thành phần hoạt chất hoặc các thành phần khác của sản phẩm thuốc. Các thông số xác nhận thử nghiệm có thể được sử dụng trong các quy trình phân tích khác (ví dụ: thử nghiệm độ hòa tan).

Mục đích của các thủ tục phân tích cần được xác định rõ ràng, vì điều này quyết định việc lựa chọn các đặc tính xác nhận cần được đánh giá trong quá trình xác nhận.

9. Các đặc điểm xác nhận điển hình sau đây của quy trình phân tích cần được đánh giá:

a) độ chính xác (đúng);

b) độ chính xác:

độ lặp lại;

độ chính xác trung gian (trong phòng thí nghiệm);

c) tính đặc hiệu;

d) giới hạn phát hiện;

e) giới hạn định lượng;

f) độ tuyến tính;

g) phạm vi ứng dụng (lĩnh vực phân tích).

10. Các đặc điểm xác nhận quan trọng nhất để xác nhận các loại thủ tục phân tích khác nhau được trình bày trong bảng.

Bàn. Các đặc điểm xác thực để xác nhận các loại thủ tục phân tích khác nhau

________________
* Nếu xác định được độ tái lập thì không cần độ chính xác trung gian.

** Sự thiếu cụ thể của một phương pháp phân tích có thể được bù đắp bằng cách sử dụng một hoặc nhiều phương pháp phân tích bổ sung.

*** Có thể được yêu cầu trong một số trường hợp (ví dụ, khi giới hạn phát hiện và giới hạn chuẩn hóa cho tạp chất được phát hiện gần nhau).

Ghi chú. "-" - đặc tính không được đánh giá, "+" - đặc tính được đánh giá.


Danh sách quy định phải được coi là điển hình cho việc xác nhận các quy trình phân tích. Có thể có những trường hợp ngoại lệ yêu cầu sự giải thích riêng của nhà sản xuất sản phẩm thuốc. Đặc tính của kỹ thuật phân tích như tính ổn định (tính mạnh) không được trình bày trong bảng, nhưng nó cần được xem xét ở giai đoạn thích hợp trong quá trình phát triển kỹ thuật phân tích.

Việc xác nhận lại (xác thực lại) có thể cần thiết trong các trường hợp sau (nhưng không giới hạn đối với chúng):

thay đổi sơ đồ tổng hợp dược chất;

thay đổi thành phần của sản phẩm thuốc;

thay đổi trong phương pháp luận phân tích.

Việc xác nhận lại không được thực hiện nếu nhà sản xuất đưa ra lý do. Mức độ xác nhận lại phụ thuộc vào bản chất của những thay đổi được đưa vào.

IV. Phương pháp luận để xác nhận các thủ tục phân tích

1. Yêu cầu chung đối với phương pháp luận để xác nhận các phương pháp phân tích

11. Phần này tóm tắt các đặc điểm được tính đến khi xác thực các phương pháp phân tích, đồng thời trình bày một số cách tiếp cận và khuyến nghị để thiết lập các đặc điểm xác nhận khác nhau của mỗi phương pháp phân tích.

12. Trong một số trường hợp (ví dụ, khi chứng minh tính đặc hiệu), có thể sử dụng kết hợp một số phương pháp phân tích để đảm bảo chất lượng của dược chất hoặc sản phẩm thuốc.

13. Tất cả các dữ liệu liên quan được thu thập trong quá trình xác nhận và các công thức được sử dụng để tính toán các đặc điểm xác nhận phải được trình bày và phân tích.

14. Có thể sử dụng các cách tiếp cận khác với những cách được nêu trong Hướng dẫn này. Người nộp đơn chịu trách nhiệm về việc lựa chọn quy trình và giao thức xác nhận. Trong trường hợp này, mục tiêu chính của việc xác nhận phương pháp phân tích là xác nhận tính phù hợp của phương pháp với mục đích đã định. Do tính phức tạp của chúng, các phương pháp tiếp cận quy trình phân tích đối với các sản phẩm sinh học và công nghệ sinh học có thể khác với các quy trình được mô tả trong Hướng dẫn này.

15. Trong suốt quá trình nghiên cứu xác nhận, nên sử dụng các tài liệu tham khảo về các đặc điểm đã biết và được lập thành văn bản. Độ tinh khiết cần thiết của các chất chuẩn phụ thuộc vào mục đích sử dụng.

16. Các đặc điểm xác nhận khác nhau được thảo luận trong các tiểu mục riêng biệt của phần này. Cấu trúc của phần này phản ánh tiến trình của quá trình phát triển và đánh giá phương pháp phân tích.

17. Công việc thử nghiệm cần được lập kế hoạch để các đặc điểm xác nhận thích hợp được nghiên cứu đồng thời, cung cấp dữ liệu đáng tin cậy về khả năng của quy trình phân tích (ví dụ: tính đặc hiệu, độ tuyến tính, phạm vi áp dụng, độ đúng và độ chính xác).

2. Tính cụ thể

18. Các nghiên cứu về tính đặc hiệu phải được thực hiện trong quá trình xác nhận các phép thử nhận dạng, tạp chất và định lượng. Các thủ tục xác nhận tính đặc hiệu phụ thuộc vào mục đích sử dụng của phương pháp phân tích.

19. Cách xác nhận tính đặc hiệu phụ thuộc vào các nhiệm vụ mà phương pháp phân tích đã cho dự kiến. Không phải trong mọi trường hợp đều có thể khẳng định rằng phương pháp phân tích là dành riêng cho một chất phân tích nhất định (tính chọn lọc hoàn toàn). Trong trường hợp này, nên sử dụng kết hợp 2 hoặc nhiều phương pháp phân tích.

Sự thiếu cụ thể của một kỹ thuật phân tích có thể được bù đắp bằng cách sử dụng một hoặc nhiều kỹ thuật phân tích bổ sung.

20. Tính cụ thể cho các loại thử nghiệm khác nhau có nghĩa là:

a) khi thử nghiệm để nhận biết - xác nhận rằng quy trình cho phép nhận dạng chất phân tích;

b) khi kiểm tra tạp chất - xác nhận rằng quy trình cho phép bạn nhận ra chính xác các tạp chất trong mẫu (ví dụ, kiểm tra các hợp chất liên quan, kim loại nặng, hàm lượng dung môi dư, v.v.);

c) trong các phép thử định lượng - xác nhận rằng kỹ thuật này cho phép bạn thiết lập hàm lượng hoặc hoạt tính của chất phân tích trong mẫu.

Nhận biết

21. Phép thử nhận biết đạt yêu cầu phải có khả năng phân biệt giữa các hợp chất liên quan chặt chẽ về cấu trúc có thể có trong mẫu. Tính chọn lọc của quy trình phân tích có thể được xác nhận bằng cách thu được kết quả dương tính (có thể bằng cách so sánh với mẫu chuẩn đã biết) đối với mẫu có chứa chất phân tích và kết quả âm tính đối với mẫu không chứa chất phân tích.

22. Để khẳng định không có kết quả dương tính giả, có thể thực hiện phép thử nhận biết đối với các chất có cấu trúc tương tự hoặc các chất đi kèm với chất phân tích.

23. Việc lựa chọn các chất có khả năng gây ảnh hưởng đến thử nghiệm cần được biện minh.

Kiểm tra định lượng và tạp chất

24. Khi xác nhận tính đặc hiệu cho quy trình phân tích sử dụng phương pháp phân tách sắc ký, cần gửi các sắc ký đồ đại diện với sự nhận biết thích hợp của các thành phần riêng lẻ. Cần phải sử dụng các cách tiếp cận tương tự đối với các kỹ thuật dựa trên sự phân tách khác.

25. Sự phân tách tới hạn trong sắc ký cần được nghiên cứu ở mức độ thích hợp. Trong trường hợp có sự phân tách quan trọng, nên đặt giá trị độ phân giải của 2 thành phần rửa giải gần nhau nhất.

26. Khi sử dụng phương pháp định lượng không đặc hiệu, cần sử dụng các phương pháp phân tích bổ sung và xác nhận tính cụ thể của toàn bộ tập hợp các phương pháp. Ví dụ, nếu việc xác định định lượng được thực hiện bằng phương pháp chuẩn độ trong quá trình giải phóng dược chất, nó có thể được bổ sung bằng phép thử thích hợp đối với các tạp chất.

27. Phương pháp này giống nhau đối với cả định lượng và kiểm tra tạp chất.

Sự hiện diện của các mẫu tạp chất

28. Trong trường hợp mẫu có tạp chất, việc xác định độ đặc trưng của quy trình phân tích như sau:

a) để xác định định lượng, cần xác nhận tính chọn lọc của phép xác định chất khi có tạp chất và (hoặc) các thành phần khác của mẫu. Trong thực tế, điều này được thực hiện bằng cách thêm vào mẫu (dược chất hoặc thuốc) các tạp chất và (hoặc) tá dược với lượng thích hợp và nếu có bằng chứng về việc chúng không ảnh hưởng đến kết quả xác định định lượng hoạt chất;

b) khi kiểm tra tạp chất, có thể xác định tính đặc hiệu bằng cách thêm tạp chất vào dược chất hoặc sản phẩm thuốc với số lượng nhất định và nếu có bằng chứng về sự tách biệt của các tạp chất này với nhau và (hoặc) với các thành phần khác của mẫu.

Không có tạp chất mẫu

29. Nếu không có mẫu chuẩn về tạp chất hoặc sản phẩm phân huỷ, có thể xác nhận tính đặc hiệu bằng cách so sánh kết quả thử nghiệm của mẫu có chứa tạp chất hoặc sản phẩm phân huỷ với kết quả của một phương pháp đã được xác nhận khác (ví dụ, dược điển hoặc phương pháp phân tích đã được xác nhận khác (độc lập) phương pháp). Khi thích hợp, vật liệu chuẩn đối với tạp chất phải bao gồm các mẫu đã được bảo quản trong các điều kiện ứng suất quy định (ánh sáng, nhiệt, độ ẩm, sự thủy phân và oxy hóa axit (bazơ)).

30. Trường hợp định lượng cần so sánh 2 kết quả.

31. Trong trường hợp kiểm tra tạp chất, cần phải so sánh các cấu hình tạp chất.

32. Để chứng minh sự tương ứng của pic của chất phân tích chỉ với một thành phần, nên tiến hành các nghiên cứu về độ tinh khiết của các pic (ví dụ, việc sử dụng phát hiện dãy diode, khối phổ).

3. Tính tuyến tính

33. Mối quan hệ tuyến tính phải được đánh giá trên toàn bộ phạm vi áp dụng của phương pháp phân tích. Nó có thể được xác nhận trực tiếp trên dược chất (bằng cách pha loãng dung dịch chuẩn cơ bản) và (hoặc) trên các phần đã cân riêng biệt của hỗn hợp nhân tạo (mẫu) của các thành phần thuốc bằng cách sử dụng phương pháp được đề xuất. Khía cạnh thứ hai được phép nghiên cứu trong quá trình xác định phạm vi ứng dụng (lĩnh vực phân tích) của phương pháp.

34. Độ tuyến tính được đánh giá trực quan bằng cách vẽ biểu đồ tín hiệu phân tích như một hàm của nồng độ hoặc lượng chất phân tích. Nếu có một mối quan hệ tuyến tính rõ ràng, các kết quả thu được phải được xử lý bằng các phương pháp thống kê phù hợp (ví dụ, bằng cách tính một đường hồi quy theo phương pháp bình phương nhỏ nhất). Có thể cần phải chuyển đổi toán học các kết quả thử nghiệm để có được sự tuyến tính giữa kết quả xét nghiệm và nồng độ mẫu trước khi phân tích hồi quy. Kết quả của phân tích đường hồi quy có thể được sử dụng để đánh giá một cách toán học mức độ tuyến tính.

35. Trong trường hợp không có tính tuyến tính, dữ liệu thử nghiệm phải được biến đổi về mặt toán học trước khi phân tích hồi quy.

36. Để xác nhận tính tuyến tính, cần xác định và trình bày hệ số tương quan hoặc hệ số xác định, hệ số chặn hồi quy tuyến tính, độ dốc hồi quy và tổng bình phương độ lệch còn lại, đồng thời phải đính kèm biểu đồ với tất cả dữ liệu thực nghiệm.

37. Nếu không quan sát được độ tuyến tính đối với bất kỳ loại biến đổi toán học nào (ví dụ, khi xác nhận phương pháp phân tích miễn dịch), tín hiệu phân tích phải được mô tả bằng cách sử dụng hàm tương ứng của nồng độ (lượng) chất phân tích trong mẫu.

V. Phạm vi ứng dụng (lĩnh vực phân tích)

39. Phạm vi áp dụng của phương pháp phân tích phụ thuộc vào mục đích của nó và được xác định trong nghiên cứu độ tuyến tính. Trong phạm vi ứng dụng, quy trình phải cung cấp độ tuyến tính, độ chính xác và độ chính xác cần thiết.

40. Phạm vi áp dụng (lĩnh vực phân tích) của các phương pháp phân tích sau đây nên được coi là mức tối thiểu có thể chấp nhận được:

a) để xác định định lượng hoạt chất trong dược chất hoặc sản phẩm thuốc - từ nồng độ (hàm lượng) 80% đến nồng độ (hàm lượng) 120% nồng độ (hàm lượng) danh nghĩa;

b) để có sự đồng nhất về liều lượng - từ nồng độ (hàm lượng) 70 phần trăm đến nồng độ (hàm lượng) 130 phần trăm, nếu phạm vi rộng hơn không được biện minh cho sản phẩm thuốc tùy thuộc vào dạng bào chế (ví dụ, thuốc hít định lượng );

c) để kiểm tra độ hòa tan - ± 20 phần trăm (tuyệt đối) của phạm vi sử dụng danh nghĩa. Ví dụ: nếu các thông số kỹ thuật cho một công thức phát hành sửa đổi bao gồm phạm vi từ 20 phần trăm trong giờ đầu tiên đến 90 phần trăm nội dung được công bố trong 24 giờ, thì phạm vi sử dụng đã được xác nhận phải là từ 0 đến 110 phần trăm của nội dung đã khai báo;

d) để xác định tạp chất - từ giới hạn phát hiện tạp chất đến giá trị 120% quy định trong tiêu chuẩn kỹ thuật;

e) Đối với các tạp chất cực mạnh hoặc có độc tính hoặc tác dụng dược lý không lường trước được, giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng phải tương ứng với mức độ kiểm soát các tạp chất này. Để xác nhận các quy trình kiểm tra tạp chất được sử dụng trong quá trình phát triển, có thể cần đặt miền phân tích gần giới hạn giả định (có thể có);

f) nếu việc định lượng và độ tinh khiết được nghiên cứu đồng thời bằng cách sử dụng một phép thử và chỉ sử dụng chất chuẩn 100%, thì sự phụ thuộc tuyến tính phải nằm trong toàn bộ phạm vi áp dụng của phương pháp phân tích, bắt đầu từ ngưỡng báo cáo đối với tạp chất (phù hợp với các quy tắc để nghiên cứu các tạp chất trong các sản phẩm thuốc và thiết lập các yêu cầu đối với chúng trong các thông số kỹ thuật đã được Ủy ban Kinh tế Á-Âu phê duyệt) hàm lượng lên đến 120 phần trăm được quy định trong đặc điểm kỹ thuật để xác định định lượng.

Vi. Đúng

41. Cần thiết lập độ chính xác cho toàn bộ phạm vi áp dụng của quy trình phân tích.

1. Định lượng hoạt chất dược liệu

Dược chất

42. Có thể sử dụng một số phương pháp đánh giá tính đúng đắn:

áp dụng kỹ thuật phân tích đối với chất phân tích có mức độ tinh khiết đã biết (ví dụ, đối với vật liệu chuẩn);

so sánh kết quả phân tích thu được bằng phương pháp phân tích đã được xác nhận và kết quả thu được bằng phương pháp được biết là đúng và / hoặc phương pháp độc lập.

Độ đúng có thể được kết luận sau khi đã thiết lập được độ chính xác, độ tuyến tính và độ đặc hiệu.

Sản phẩm y học

43. Có thể sử dụng một số phương pháp đánh giá tính đúng đắn:

áp dụng kỹ thuật phân tích cho hỗn hợp nhân tạo (mô hình) của các thành phần của một sản phẩm thuốc, trong đó một lượng xác định trước của chất phân tích đã được thêm vào;

Trong trường hợp không có mẫu của tất cả các thành phần của sản phẩm, có thể thêm một lượng dược chất đã xác định trước vào sản phẩm đó hoặc so sánh kết quả thu được bằng kỹ thuật khác, đã biết tính đúng đắn của nó, và (hoặc) an kỹ thuật độc lập.

Kết luận về độ đúng có thể được đưa ra sau khi xác định độ chính xác, độ tuyến tính và độ đặc hiệu.

2. Định lượng tạp chất

44. Độ chính xác được xác định trên các mẫu (dược chất và sản phẩm thuốc) đã được thêm vào một lượng tạp chất đã biết.

45. Trong trường hợp không có mẫu xác định tạp chất và (hoặc) sản phẩm suy thoái, có thể chấp nhận so sánh kết quả với kết quả thu được bằng phương pháp độc lập. Được phép sử dụng tín hiệu phân tích của hoạt chất.

46. ​​Cần chỉ ra cách cụ thể để biểu thị hàm lượng các tạp chất riêng lẻ hoặc tổng của chúng (ví dụ, tính bằng phần trăm khối lượng hoặc phần trăm so với diện tích pic, nhưng trong mọi trường hợp liên quan đến chất phân tích chính) .

47. Độ chính xác được đánh giá cho ít nhất 9 phép xác định ở 3 nồng độ khác nhau, bao gồm toàn bộ phạm vi sử dụng (tức là 3 nồng độ và 3 lần lặp lại cho mỗi nồng độ). Các định nghĩa phải bao gồm tất cả các giai đoạn của phương pháp luận.

48. Độ chính xác được biểu thị bằng giá trị của độ mở tính bằng phần trăm theo kết quả xác định định lượng một chất được thêm vào mẫu phân tích với một lượng đã biết, hoặc sự khác biệt giữa giá trị trung bình thu được và giá trị thực (chuẩn), tính đến tính các khoảng tin cậy tương ứng.

Vii. Độ chính xác

49. Việc xác nhận giá trị của các xét nghiệm và kiểm tra tạp chất liên quan đến việc xác định độ chụm.

50. Độ chính xác được đặt ở 3 mức: độ lặp lại, độ chính xác trung gian và độ tái lập. Độ chính xác phải được thiết lập bằng cách sử dụng các mẫu đồng nhất, xác thực. Nếu không thể lấy được mẫu đồng nhất thì cho phép xác định độ chụm bằng cách sử dụng các mẫu (mẫu) được chuẩn bị nhân tạo hoặc dung dịch mẫu. Độ chụm của quy trình phân tích thường được biểu thị bằng phương sai, độ lệch chuẩn hoặc hệ số biến thiên của một loạt phép đo.

VIII. Độ lặp lại

51. Độ lặp lại được xác định bằng cách thực hiện ít nhất 9 lần xác định nồng độ trong phạm vi áp dụng phương pháp phân tích (3 nồng độ và 3 lần lặp lại cho mỗi nồng độ), hoặc ít nhất 6 lần xác định nồng độ đối với mẫu có 100% hàm lượng chất phân tích.

IX. Độ chính xác trung bình (trong phòng thí nghiệm)

52. Mức độ thiết lập độ chụm trung gian phụ thuộc vào điều kiện sử dụng phương pháp phân tích. Người nộp đơn phải thiết lập ảnh hưởng của các yếu tố ngẫu nhiên đến độ chính xác của quy trình phân tích. Các biến điển hình cần điều tra là ngày khác nhau, nhà phân tích, thiết bị, v.v. Không cần phải nghiên cứu những ảnh hưởng này một cách riêng biệt. Khi nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố khác nhau, nên sử dụng thiết kế thực nghiệm.

X. Tính tái lập

53. Độ tái lập mô tả độ chụm trong thí nghiệm liên phòng. Độ tái lập cần được xác định trong trường hợp tiêu chuẩn hóa phương pháp phân tích (ví dụ, khi nó được đưa vào Dược điển của Liên minh hoặc trong Dược điển của các Quốc gia thành viên). Không bắt buộc phải đưa dữ liệu về độ tái lập vào hồ sơ đăng ký.

XI. Trình bày dữ liệu

54. Đối với mỗi loại độ chụm, độ lệch chuẩn, độ lệch chuẩn tương đối (hệ số biến thiên) và khoảng tin cậy phải được chỉ ra.

XII. Giới hạn phát hiện

55. Có nhiều cách tiếp cận khác nhau để xác định giới hạn phát hiện, tùy thuộc vào kỹ thuật là công cụ hay không công cụ. Các cách tiếp cận khác cũng được cho phép.

Lần thứ XIII. Đánh giá trực quan

56. Đánh giá trực quan có thể được sử dụng cho cả kỹ thuật không công cụ và công cụ. Giới hạn phát hiện được thiết lập bằng cách phân tích các mẫu có nồng độ đã biết của chất phân tích và xác định hàm lượng tối thiểu mà chất phân tích được phát hiện một cách đáng tin cậy.

XIV. Đánh giá giới hạn phát hiện về tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu

57. Cách tiếp cận này chỉ có thể áp dụng cho các quy trình phân tích mà nhiễu đường cơ sở được quan sát thấy.

58. Việc xác định tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu được thực hiện bằng cách so sánh tín hiệu thu được từ các mẫu có nồng độ thấp đã biết với tín hiệu thu được từ mẫu trắng và thiết lập nồng độ tối thiểu mà chất phân tích có thể được phát hiện một cách đáng tin cậy. Tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu từ 3: 1 đến 2: 1 được coi là chấp nhận được để ước tính giới hạn phát hiện.

XV. Đánh giá giới hạn phát hiện từ độ lệch chuẩn của tín hiệu phân tích và độ dốc của đường chuẩn

59. Giới hạn phát hiện (LOD) có thể được thể hiện như sau:

ở đâu:

60. Giá trị k được tính từ đường chuẩn của chất phân tích. Việc ước lượng s có thể được thực hiện theo một số cách:

b) dọc theo đường chuẩn. Phân tích đường chuẩn thu được được vẽ cho các mẫu có hàm lượng chất phân tích gần với giới hạn phát hiện. Độ lệch chuẩn còn lại của đường hồi quy hoặc độ lệch chuẩn của điểm giao với trục tọa độ (độ lệch chuẩn của giao điểm của hồi quy tuyến tính) có thể được sử dụng làm độ lệch chuẩn.

Xvi. Trình bày dữ liệu

61. Cần chỉ ra giới hạn phát hiện và phương pháp xác định giới hạn đó. Nếu việc xác định giới hạn phát hiện dựa trên đánh giá trực quan hoặc tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu, thì việc trình bày các sắc ký đồ liên quan được coi là đủ để chứng minh điều đó.

62. Nếu giá trị của giới hạn phát hiện nhận được bằng cách tính toán hoặc ngoại suy, thì ước tính phải được xác nhận bằng thử nghiệm độc lập với số lượng mẫu đủ lớn có hàm lượng chất phân tích, tương ứng hoặc gần với giới hạn phát hiện.

XVII. Giới hạn định lượng

63. Giới hạn định lượng là đặc điểm xác nhận cần thiết của các phương pháp được sử dụng để xác định hàm lượng thấp của các chất trong mẫu, đặc biệt để xác định tạp chất và (hoặc) sản phẩm phân huỷ.

64. Một số cách tiếp cận để xác định giới hạn định lượng có thể thực hiện được, tùy thuộc vào kỹ thuật là công cụ hay không công cụ. Các cách tiếp cận khác được cho phép.

Xviii. Đánh giá trực quan

65. Đánh giá trực quan có thể được sử dụng cho cả kỹ thuật không công cụ và công cụ.

66. Giới hạn định lượng thường được thiết lập bằng cách phân tích các mẫu có nồng độ chất phân tích đã biết và ước tính mức tối thiểu mà chất phân tích có thể được định lượng với độ chính xác và độ chính xác chấp nhận được.

XIX. Đánh giá giới hạn định lượng tín hiệu-tiếng ồn

67. Cách tiếp cận này chỉ có thể áp dụng cho các phương pháp đo trong đó tiếng ồn đường cơ sở được quan sát.

68. Việc xác định tỷ số tín hiệu trên nhiễu được thực hiện bằng cách so sánh các tín hiệu đo được từ các mẫu có nồng độ thấp đã biết của chất phân tích với các tín hiệu thu được từ các mẫu trắng và thiết lập nồng độ tối thiểu mà tại đó chất phân tích có thể tin cậy được. định lượng. Tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu điển hình là 10: 1.

XX. Ước tính giới hạn định lượng từ độ lệch chuẩn của tín hiệu và độ dốc của đường chuẩn

69. Giới hạn Định lượng (LQR) có thể được thể hiện như sau:

ở đâu:

s là độ lệch chuẩn của tín hiệu phân tích;

k là tiếp tuyến của hệ số góc của đường chuẩn.

70. Giá trị k được tính từ đường chuẩn của chất phân tích. Việc ước lượng s có thể được thực hiện theo một số cách:

a) bằng độ lệch chuẩn của mẫu trắng. Tín hiệu phân tích được đo cho đủ số lượng ô trống và độ lệch chuẩn của các giá trị của chúng được tính toán;

b) dọc theo đường chuẩn. Phân tích đường chuẩn thu được đối với các mẫu có chất phân tích gần với giới hạn định lượng. Độ lệch chuẩn còn lại của đường hồi quy hoặc độ lệch chuẩn của điểm giao với trục tọa độ (độ lệch chuẩn của giao điểm của hồi quy tuyến tính) có thể được sử dụng làm độ lệch chuẩn.

XXI. Trình bày dữ liệu

71. Cần chỉ ra giới hạn định lượng và phương pháp xác định nó.

72. Giới hạn định lượng sau đó phải được xác nhận bằng cách phân tích đủ số lượng mẫu có hàm lượng chất phân tích bằng hoặc gần với giới hạn định lượng.

73. Các cách tiếp cận khác với những cách được liệt kê ở trên có thể được chấp nhận.

XXII. Ổn định (mạnh mẽ)

74. Việc nghiên cứu độ ổn định (độ mạnh) phải được thực hiện ở giai đoạn phát triển, số lượng nghiên cứu phụ thuộc vào phương pháp phân tích đang xem xét. Cần phải thể hiện độ tin cậy của phép phân tích với những thay đổi có chủ ý trong các tham số (điều kiện) của phương pháp.

75. Nếu kết quả của các phép đo phụ thuộc vào sự thay đổi của các điều kiện áp dụng quy trình phân tích thì cần phải giám sát chặt chẽ việc tuân thủ các điều kiện đó hoặc quy định các biện pháp phòng ngừa trong quá trình thử nghiệm.

76. Để đảm bảo rằng phương pháp phân tích được duy trì khi sử dụng nó, một trong những hệ quả của việc nghiên cứu tính mạnh mẽ phải là việc thiết lập một loạt các tham số về tính phù hợp của hệ thống (ví dụ, một phép thử độ phân giải).

77. Các biến thể tham số phổ biến là:

độ ổn định của các dung dịch sử dụng trong quy trình phân tích;

thời gian chiết xuất.

Các thông số biến đổi cho sắc ký lỏng là:

thay đổi độ pH của pha động;

thay đổi thành phần của pha động;

các cột khác nhau (loạt và nhà cung cấp khác nhau);

nhiệt độ;

tốc độ của pha động (tốc độ dòng chảy).

Các thông số biến đổi cho sắc ký khí là:

các cột khác nhau (loạt và nhà cung cấp khác nhau);

nhiệt độ;

vận tốc khí mang.

XXIII. Đánh giá tính phù hợp của hệ thống

78. Đánh giá tính phù hợp của hệ thống là một phần không thể thiếu của nhiều kỹ thuật phân tích. Các thử nghiệm này dựa trên khái niệm rằng thiết bị, điện tử, hoạt động phân tích và các mẫu được phân tích tạo thành một hệ thống hoàn chỉnh và cần được đánh giá như vậy. Tiêu chí về tính phù hợp của hệ thống phải được thiết lập cho một phương pháp cụ thể và phụ thuộc vào loại phương pháp phân tích đang được xác nhận. Thông tin thêm có thể được tìm thấy trong Dược điển của Liên minh hoặc trong Dược điển của các Quốc gia Thành viên.



Văn bản điện tử của tài liệu
được lập bởi Công ty Cổ phần "Kodeks" và được xác minh bởi:
trang điện tử chính thức
Liên minh kinh tế Á-Âu
www.eaeunion.org, 20.07.2018